上海軒澤康生物植物N-甲基腐胺氧化酶(MPO)ELISA試劑盒配置如下：(標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：0、25、50、100、200、400 U/mL）

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被N-甲基腐胺氧化酶（MPO）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的N-甲基腐胺氧化酶（MPO）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。實驗需自備物品： 酶標(biāo)儀（450nm）； 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL； 37℃恒溫箱。

植物N-甲基腐胺氧化酶(MPO)ELISA試劑盒注意事項：

1） 充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果很重要，在加液后請輕輕晃動整個96板孔，以保證混勻。

2） TMB溶液請勿接觸氧化劑或金屬，否則容易失效。

3） 加樣時請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過程中必須避免氣泡的產(chǎn)生。

4） 檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。

5） 洗滌過程非常重要，洗滌不充分會下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。

ELISA常見問題解答：

1.     問：是否可以使用不同試劑盒的組分？

上海軒澤康生物解析：每一個試劑盒包含具有特定批號的組件，以確保所有組件單獨以及試劑盒中所有其他組件都能達(dá)到最佳性能。對這些特定批次進(jìn)行質(zhì)量控制測試。絕不建議用戶使用自己的組件或其他供應(yīng)商試劑盒。

2.     問：我的標(biāo)準(zhǔn)曲線看起來很好，但我沒有在樣本中得到預(yù)期的信號，這是為什么？

上海軒澤康生物解析：樣品可能不含分析物。矩陣效應(yīng)可能掩蓋檢測。確保按照我司試劑盒中說明書進(jìn)行稀釋。稀釋，前請檢查以確保稀釋操作正確。過度稀釋可能導(dǎo)致樣品低于標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍。

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