【肝細(xì)胞生長因子（HGF）簡介】：是一種旁分泌的細(xì)胞生長、運(yùn)動和形態(tài)發(fā)生因子。它由間質(zhì)細(xì)胞分泌，主要針對并作用于上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞，但也作用于造血祖細(xì)胞和T細(xì)胞。它已被證明在胚胎器官發(fā)育，特別是在肌肉生成、成人器官再生和傷口愈合中具有重要作用。它以單一非活性多肽的形式分泌，被絲按酸蛋白酶裂解為69 kDa的α鏈和34 kDa的β鏈，α鏈和β鏈之間的二硫鍵產(chǎn)生活性的異二聚體分子。該蛋白屬于S1肽酶的漿細(xì)胞原亞家族，但沒有可檢測的蛋白酶活性。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中人肝細(xì)胞生長因子(HGF)的含量。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

 實驗前準(zhǔn)備要點：

1. 準(zhǔn)備各種實驗儀器及材料（如：37℃恒溫箱，450nm酶標(biāo)儀、高速離心機(jī)、高精度加樣器及槍頭等等）

2. 按照生物實驗室安全防護(hù)條例，穿著實驗服并佩戴乳膠手套做好防護(hù)工作

3. 使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)各試劑取出，平衡至室溫（至少30分鐘）

4. 嚴(yán)格按照說明書的操作方法進(jìn)行操作。說明書以英文說明書為準(zhǔn)。

我司ELISA檢測試劑盒分為96T和48T兩種規(guī)格。96T試劑盒可檢測90個樣，48T試劑盒可檢測42個樣。

人肝細(xì)胞生長因子(HGF)科研ELISA試劑盒組成及其配置：

ELISA試劑盒檢測范圍等數(shù)據(jù)，因檢測樣本 的不同而調(diào)整，實際數(shù)據(jù)以隨貨說明書為準(zhǔn)。

人肝細(xì)胞生長因子(HGF)科研ELISA試劑盒技術(shù)小提示：

1）待檢樣品要澄清，否則會影響結(jié)果。
2）要保證移液槍的準(zhǔn)確性，誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。

3）要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后，要更換槍頭；吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差；用槍吸取液體時速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

4）實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。檢測前，要打開酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。

5）實驗時，要使底物避光保存；底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配；底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。

6）將液體加到酶標(biāo)孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。

7）溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。溫浴時間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。
8）洗板時，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘。沒有洗板機(jī)時，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報紙或毛紙上用力拍干。
9）洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
10）應(yīng)盡量做雙孔實驗，這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

關(guān)于做ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線時需要注意的細(xì)節(jié)問題：

1. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能覆蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度*陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。

2. 檢測標(biāo)準(zhǔn)樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準(zhǔn)確性。

3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。

4. 做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?，但一般來說，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至?xí)r0.999.

5. 樣品的濃度等指標(biāo)時根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出來的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作時比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。

6. *采用倍比稀釋法配置標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。

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